羟氨苄青霉素三水酸也是一种半合成的广谱青霉素，其不耐青霉素酶，对革兰氏阳性球菌和杆菌抗菌作用与青霉素相同，对革兰氏阴性菌作用强于青霉素。因此临床上可以用于治疗由流血嗜血杆菌、大肠埃希菌、奇异变形菌、沙门菌属、痢疾志贺菌、脑膜炎奈瑟菌等引起的呼吸道感染、胃肠道感染、尿路感染、软组织感染、脑膜炎、败血症、以及心内膜炎等。